畜牧家禽網(wǎng)首頁 > 技術(shù)中心> 育種技術(shù) > 食用菌制種實(shí)用技術(shù)
畜牧家禽網(wǎng) 來源:互聯(lián)網(wǎng) 閱讀數(shù):
隨著食用菌產(chǎn)業(yè)的蓬勃發(fā)展,菌種需要量隨之增加,而現(xiàn)有菌種生產(chǎn)單位明顯偏少,許多菇農(nóng)不得不向外引種。長(zhǎng)途購(gòu)運(yùn)菌種不僅花費(fèi)大,成本高而且菌種因破瓶而易引起雜菌污染,從而嚴(yán)重影響栽培食用菌的經(jīng)濟(jì)效益。菇農(nóng)若能掌握菌種生產(chǎn)程序和制種技術(shù),實(shí)行自行制種,逐步發(fā)展成制種專業(yè)戶,也是一項(xiàng)很好的致富門路。 菌種生產(chǎn)程序,通常分為母種、原種和栽培種3個(gè)層次,也就是通常所說的一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)菌種。其中母種的分離選育技術(shù)性強(qiáng),要求精化;而原種和栽培種的制作則比較簡(jiǎn)單。下面介紹各級(jí)菌種的制作技術(shù)。
母種的分離選育
母種主要采用人工選擇、誘變育種、雜交育種和原生質(zhì)融合等手段獲得。作為一般制種專業(yè)戶,可以采用人工選擇方式分離培育母種,具體步驟與操作方法如下。
1、采集種源 從野生成人工栽培群體中,選擇有代表性的優(yōu)良菇體作為種源。種菇的標(biāo)準(zhǔn)是:八成熟,朵形圓正、肉質(zhì)肥厚,無病蟲害。采集1--2朵符合上述標(biāo)準(zhǔn)的種菇編上號(hào)碼,作為分離母種的材料。從栽培室采集的應(yīng)標(biāo)有原菌株代號(hào)。
2、培養(yǎng)基配制 瓊脂培養(yǎng)基又叫PDA培養(yǎng)基,常用配方為:馬鈴薯200--250克,瓊脂15--20克,葡萄糖20--25克,清水1000毫升。也可以加硫酸鎂1--1.5克,維生素B1微量,磷酸二氫鉀2--3克。先將馬鈴薯洗凈去皮,切成薄片,置于鋁鍋內(nèi)加水煮沸30分鐘,撈起后用4層紗布過濾,取汁。然后將瓊脂加入汁內(nèi),邊加熱邊攪拌,讓瓊脂充分溶化;再將葡萄糖等加入,稍煮幾分鐘后,同樣用4層紗布過濾,取其汁液。將汁液趁熱裝入玻璃試管內(nèi)。裝至管長(zhǎng)的1/5,管口用棉花塞緊,或?qū)⒅貉b入玻璃三角瓶?jī)?nèi),裝量20毫升。然后置于高壓鍋內(nèi),在98--108千帕/厘米的壓力下滅菌30分鐘左右。滅菌后及時(shí)取出,趁熱將試管斜排于桌上,冷卻后即成為固體斜面培養(yǎng)基。
3、母種分離方法 有孢子彈射、組織分離和基內(nèi)分離3種方法。①孢子彈射法。將種菇表面消毒,吸干水分后,將菇體懸掛于裝有瓊脂培養(yǎng)基的三角瓶?jī)?nèi),讓菇體內(nèi)的袍子自然散落在培養(yǎng)基上萌發(fā)菌絲。也可以剪取一小決菇體,貼附在試管斜面培養(yǎng)基表面,讓孢子散落在培養(yǎng)基上萌發(fā)菌絲,即能獲得母種;③組織分離法。將消毒過的種菇,在接種箱內(nèi)用手從菇柄處對(duì)半解開,或用刀片切開,使菇體形成對(duì)開。在菌蓋和菌柄交界處或菌褶處,用接種刀切取一小塊菇體,然后縱切成5毫米x10毫米的小薄片,用接種針挑取一塊薄片,接入斜面培養(yǎng)基的中央,每支試管接種一小決薄片,待其萌發(fā)菌絲,即可得到母種;(3)基內(nèi)分離法。選擇已長(zhǎng)菇的木段,削去樹皮及表層木質(zhì)部,用70%的酒精消毒后,鋸成1厘米厚的薄片,放入0.1%的升汞水中消毒1--2分鐘,再用滅菌水洗去殘液。然后再將小薄片劈成0.5--1厘米寬的小條,接入斜面培養(yǎng)基中央,待長(zhǎng)出菌絲后即得母種。也可以在已長(zhǎng)菇的菌袋中,經(jīng)消毒處理后,用接種針鉤取袋內(nèi)色澤純、長(zhǎng)勢(shì)旺的菌絲體,接種在試管斜面培養(yǎng)基中央,待萌發(fā)菌絲后,同樣獲得菌種。
4、適溫培養(yǎng) 通過上述不同方式將菌種分離接種于試管后,要及時(shí)將試管移入已消毒的培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng),溫度控制在25℃左右,使分離獲得的孢子或菌絲在適溫下發(fā)育。一般孢子彈射3--4天后孢子萌發(fā)成菌落,10天后菌絲長(zhǎng)滿管;組織分離接種后2--3天,菌絲即萌發(fā),并在培養(yǎng)基上蔓延生長(zhǎng);菇木分離接種后,7天菌絲即恢復(fù)生長(zhǎng)。
5、選育提純 通過上述方法得到的菌絲,不一定都是優(yōu)質(zhì)的,還需要選育提純。因此,在菌絲萌發(fā)后,要認(rèn)真觀察,挑選色澤純、健壯、長(zhǎng)勢(shì)正常、無間斷的菌絲,在接種箱內(nèi)連同培養(yǎng)基鉤取菌絲,接入另備的試管培養(yǎng)基上。在23--25℃的恒溫條件下,培養(yǎng)7--10天,待菌絲長(zhǎng)滿管后,再進(jìn)行觀察,從中擇優(yōu)取用,即為“母代”母種。
6、轉(zhuǎn)管擴(kuò)接 母代母種可以轉(zhuǎn)管擴(kuò)接成“子代”母種。采用同樣的斜面培養(yǎng)基,每支可擴(kuò)接30--50支子代母種。生產(chǎn)上供應(yīng)的多為子代母種。它可以再次轉(zhuǎn)管擴(kuò)接。一般每支可擴(kuò)接成20--25支子代母種,但轉(zhuǎn)管次數(shù)不得超過5次。
7、出菇試驗(yàn) 分離選育的母種,還必須進(jìn)行出菇試驗(yàn)。方法是:把母種接種于瓶或袋裝的木屑培養(yǎng)基上,根據(jù)各種菇耳種性對(duì)溫度的要求,進(jìn)行適溫培養(yǎng),直至出菇才證實(shí)可用于生產(chǎn)。
原種繁殖培養(yǎng)
將母種接在瓶或袋的木屑培養(yǎng)基上,通過培養(yǎng),即成原種。其技術(shù)要求如下。
1、原種木屑培養(yǎng)基配方 雜木屑77.5%,麥麩20%,蔗糖1%,石膏粉1.2%,硫酸鎂0.3%。pH值(滅菌前)6.5--7,含水量調(diào)至60%。將上述原、輔料混合拌勻,裝入750毫升的玻璃菌種瓶?jī)?nèi),裝料要求下松上緊。瓶口塞緊棉花,再用牛皮紙包住瓶頸與棉塞。然后置于高壓滅菌鍋內(nèi),在147千帕/平方厘米壓力下滅菌2--2.5小時(shí)。也可進(jìn)行常壓滅菌,在100℃下保持10--11小時(shí),達(dá)標(biāo)后趁熱取出,讓其冷卻。
2、接入菌種 待料溫降至25℃以下時(shí),在滅菌條件下,將試管種分割成若干決,通過酒精燈火焰迅速接入原種培養(yǎng)基上,每支母種可按4--6瓶原種。
3、發(fā)菌培養(yǎng) 接種后及時(shí)將玻璃菌種瓶移入25℃菌種培養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。空間相對(duì)濕度控制在70℃以上,避免強(qiáng)光照射。原種培養(yǎng)時(shí)間一般菇類需要40--50天,草菇、銀耳只需15--20天即可。
4、去雜選優(yōu) 原種培育過程中,要每天進(jìn)行觀察,如發(fā)現(xiàn)有雜菌污染的,應(yīng)立即淘汰。
栽培種擴(kuò)大培育
將原種再次擴(kuò)接在同樣的木屑培養(yǎng)基上,在適溫條件下培養(yǎng)30--35天即為栽培種(又叫生產(chǎn)種),可用于生產(chǎn)栽培。栽培種可用750毫升菌種專用瓶,由于使用量大,所以通常多采用聚丙烯菌種袋。袋的規(guī)格有12厘米x24厘米、15厘米x28厘米、17厘米x33厘米等,可根據(jù)各種菇耳特性和當(dāng)?shù)亓?xí)慣選擇使用。培養(yǎng)基滅菌采用常壓滅菌灶滅菌,要求滅菌溫度達(dá)100℃,保持8--10小時(shí),達(dá)標(biāo)后趁熱卸袋冷卻。待料溫降至25℃以下時(shí),在無菌條件下接入選定品種的原種。每瓶原種可擴(kuò)接成50--60瓶栽培種。菌種培育室要求干凈,防強(qiáng)光,室溫掌握在23--25℃,并經(jīng)常檢查,發(fā)現(xiàn)雜菌污染應(yīng)及時(shí)淘汰,不斷選優(yōu)去劣。當(dāng)菌絲長(zhǎng)滿袋,尖端菌絲反轉(zhuǎn)上爬1--3厘米時(shí),為適齡的栽培種。
①本網(wǎng)注明“稿件來源:畜牧家禽網(wǎng)(Agroxq.com)”的所有文字、數(shù)據(jù)、圖片和音視頻稿件,版權(quán)均屬“畜牧家禽網(wǎng)”(Agroxq.com)所有,任何企業(yè)、媒體、網(wǎng)站或個(gè)人未經(jīng)本網(wǎng)協(xié)議授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、鏈接、轉(zhuǎn)貼或以其他方式復(fù)制使用。凡經(jīng)本網(wǎng)協(xié)議授權(quán),在使用時(shí)必須注明“稿件來源:畜牧家禽網(wǎng)(Agroxq.com)”,違者本網(wǎng)將依法追究責(zé)任。
②本網(wǎng)未注明“稿件來源:畜牧家禽網(wǎng)(Agroxq.com)”的文/圖等稿件均為轉(zhuǎn)載稿,本網(wǎng)轉(zhuǎn)載出于傳遞更多信息之目的,并不意味著贊同其觀點(diǎn)或證實(shí)其內(nèi)容的真實(shí)性。如其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)下載使用,必須保留本網(wǎng)注明的“稿件來源“,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。如擅自篡改為“稿件來源:畜牧家禽網(wǎng)(Agroxq.com)”,本網(wǎng)將依法追究責(zé)任。如對(duì)稿件內(nèi)容有疑議,請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系。
③因互聯(lián)網(wǎng)信息的冗雜性及更新的迅猛性,本網(wǎng)無法及時(shí)聯(lián)系到所轉(zhuǎn)載稿件的作者,如本網(wǎng)轉(zhuǎn)載稿涉及版權(quán)等問題,請(qǐng)相關(guān)作者見稿后兩周內(nèi)及時(shí)來電或來函與“畜牧家禽網(wǎng)”(Agroxq.com)聯(lián)系。