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畜牧家禽網(wǎng)首頁 > 技術(shù)中心> 病蟲防治 > 柑桔黃龍病病原培養(yǎng)及免疫診斷
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該技術(shù)針對柑桔的毀滅性病害黃龍病，對黃龍病類細(xì)菌進(jìn)行分離培養(yǎng)，研制半合成培養(yǎng)基的配方，制定了從病葉葉脈分離 BLO的培養(yǎng)方法，建立了BLO分離培養(yǎng)技術(shù)。用人工培養(yǎng)的 BLO活菌或 BLO蛋白免疫小鼠(或家兔)制得單克隆抗體及免疫血清，并創(chuàng)立了下列4種免疫診斷方法：①酶聯(lián)免疫吸附分析法(ELISA)，即用辣根過氧化物酶標(biāo)記單克隆抗體，以聯(lián)苯二胺為顯色劑，將柑桔葉子的勻漿作材料，3天內(nèi)可得正確結(jié)果；②酶標(biāo)免疫定位法，即用辣根過氧化物酶標(biāo)記單克隆抗體，以聯(lián)苯二胺為顯色劑，將柑桔葉子的葉脈徒手切片作材料，此法為定性分析， l.5天內(nèi)可得結(jié)果；②熒光抗體檢驗(yàn)法，即用培養(yǎng)病原的免疫血清或單克隆抗體作第一抗體，以異硫氰熒光素(FITC)標(biāo)記的IgG(羊抗鼠或羊抗兔)作第二抗體，將柑桔葉子的葉脈作徒手切片為材料，此法屬定性分析方法；④膠體金一銀標(biāo)記免疫檢測法，即用膠體金標(biāo)記免疫血清或單克隆抗體，以硝酸銀作染色劑，將柑桔葉子的葉脈徒手切片作材料，也屬定性分析方法，在6小時(shí)內(nèi)完成檢測。上述技術(shù)實(shí)現(xiàn)了柑桔發(fā)病前的預(yù)知診斷，防止了病害流行，提高了果樹的生產(chǎn)能力。
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